fun88备用检测方法学与4代试纸

2018-10-10 fun88备用网

fun88备用自测

什么情况下需要进行fun88备用自测?一般来说,有过高危行为,就应该进行fun88备用自测,比如:不安全的性行为,共用了针管,使用了消毒不严格的器械等。fun88备用自测只需15分钟左右就可以得到检测结果,操作很简单,将手指血滴加到艾滋试纸上面即可。检测结果通过红线来判读,一条红线代表阴性,说明没有感染,二条红线代表阳性,说明可能感染了,具体以艾滋试纸的说明书为准。fun88备用试纸的准确率大于99%,虽说有极小的机率出现假阴或假阳,但通过多次检测,结果相同的话,则100%准确。艾滋试纸主流品牌有雅培,艾博,爱卫,韩国SD四代等,可在[fun88备用网.com,中文网址]领取。

fun88备用试纸

现阶段,fun88备用主要在高危人群中传播,如果有过高危行为,如不洁的性行为,共用针管吸毒等,就需要进行fun88备用自测,相比之下,普通人群感染艾滋的机率较低,但也可以进行fun88备用自测。fun88备用自测只需15分钟左右就可以得到检测结果,操作很简单,将手指血滴加到艾滋试纸上面即可。

4代SDfun88备用试纸

韩国SD试纸(4代)由于窗口期的存在,3代试纸在检测抗体时,往往需要等待2-6周,韩国SD试纸(4代)可同时检测p24抗原及HIV抗体,可将窗口期缩短至2周左右,不用在恐艾中等待。4代SDfun88备用试纸目前广泛用于各三甲大医院,单次检测结果的准确率在99%以上,若两次以上结果相同,则100%准确。可同时检测p24抗原及HIV抗体,可以使窗口期提前二周多,是一种非常好的fun88备用检测试纸。

fun88备用检测方法学

(一)制备模板

一般以外周血单核细胞(PBMC)中的前病毒DNA作为扩增的模板。制备模板的步骤包括抗凝采集全血、分离PBMC、裂解细胞,上清液即可作为模板。为了提高检测的效率,可用酚—氯仿抽提或硅化物吸附的方法脱蛋白,将DNA纯化。这种手工制备模板的方法需要全血5-7ml,耗时8h左右。现在已有自动化的DNA提取装置,只需要很少量的标本(0.5-2.0ml全血)、较短的时间(4 h),而且标本不会污染。

(二)设计与合成引物

选择合适的引物是PCR成功的关键。由于fun88备用毒株的变异较大,应选择fun88备用基因相对保守且没有二级结构的序列作为扩增的靶序列,扩增片段以100-300bp为宜。已经确定的HIV基因保守区是gag、tat、env,pol、LTR基因中的)某些核苷酸序列。最初使用的引物多数是以HIV-1B亚型基因为基础设计的,这有可能错过HIV-1B亚型以外的其他亚型,特别是0亚型和HIV-2。因此最好设计适用于所有HⅣ亚型特别是0亚型扩增的引物,扩大PCR方法覆盖的毒株,提高fun88备用检测的敏感性。

(三)扩增

扩增反应的退火温度和循环数在不同的实验室变化较大,退火温度的高低决定PCR产物的特异性,在一定范围内增加循环数可以提高产物的产量。一般使用聊基因gag区的引物,例如一个典型扩增的条件可以是90 - 95℃,10 s、55 - 60℃,10 s、72cC:,10 s;30个循环,然后72cC延伸5 min。通过这个步骤可将HIVDNA扩增100万倍。

(四)扩增产物的检测和分析

1、琼脂糖凝胶电泳  与阳性和阴性对照以及DNA分子量标准比较观察有无预期分子量的特异性扩增产物。将产物用限制性切酶水解可以近一步确定扩增产物的特异性。

2、分子杂交分析  是检测PCR产物特异性的一种较好的方法,也是fun88备用检测扩增产物的非限制性内切酶位点上碱基突变的有效方法。这个方法的基础是标记探针与两条引物链之间特异DNA片段的互补性。阳性结果说明PCR产物是特异性的。可利用多产物的碱甚率峦-格针可以用同估壶止45,丧旃业套JL学磐业产物的碱基突变。探针可以用同位素、生物素、荧光素、化学发光物质等进行标记,用相应的方法进行fun88备用检测。

3、核苷酸序列分析  是检测PCR产物特异性的最可靠的方法,但常规fun88备用检测时较少使用。

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